蓖麻RcDELLA基因的克隆与功能鉴定

韩雯毓1,#, 李国瑞1,2,3,4,#, 李威1, 张帅1, 徐兴源1, 闫星伊1, 风兰1, 孙佳欣1, 王双1, 赵秀平1, 段强1, 陈永胜1,2,3,4,*
1内蒙古民族大学, 内蒙古通辽028000;2内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心, 内蒙古通辽028000; 3内蒙古自治区蓖麻育种重点实验室, 内蒙古通辽028000; 4内蒙古自治区蓖麻产业协同创新中心, 内蒙古通辽028000

通信作者:陈永胜;E-mail: chenys_2000@163.com

摘 要:

赤霉素(gibberellin acid, GA)是调控植物生长发育的重要激素, DELLA通过参与GA信号转导途径, 使植株出现矮化现象。本研究以蓖麻(Ricinus communis) 2129六叶期茎尖的cDNA为模板, 利用常规PCR法成功克隆了RcDELLA基因(XM_002533984.2)的完整开放阅读框, 全长1 701 bp, 推测编码567个氨基酸。亚细胞定位试验将RcDELLA融合蛋白定位在细胞核中。以蓖麻子叶节为外植体, 利用农秆菌介导法侵染子叶节受体, 最终成功培育出7棵RcDELLA基因过表达的蓖麻植株。 PCR鉴定转基因植株结果显示为阳性, qRT-PCR结果显示阳性植株RcDELLA基因的表达量显著高于野生对照植株。对转基因植株进行GUS染色, 阳性植株的叶脉均呈蓝色。通过表型分析发现, 转基因植株株高均矮于野生型。

关键词:蓖麻; RcDELLA; 遗传转化; 亚细胞定位

收稿:2019-08-28  

资助:国家自然科学基金项目(31460353), 内蒙古自治区蓖麻育种重点实验室开放基金项目(MDK2018017、 MDK2018018),内蒙古民族大学自治区科技储备项目(2018NDCB05)。

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